细胞培养及其面临的挑战
来源:贝索(河南)生物科技有限公司 发布日期:2023-07-25 浏览量:884
1.培养液出现沉淀,同时 pH 发生变化
(1)原因:细菌,或真菌污染。
(2)对策:丢弃培养物,或用抗生素除菌。
2.培养细胞不贴壁
(1)原因:胰蛋白酶消化过度;支原体污染;培养液中无贴壁因子。
(2)对策:缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度;分离培养物,检测支原体,清洁支架和培养箱,如发现支原体污染,丢弃培养物;改变培养液成分。
3.培养细胞生长减慢
(1)原因:更换了不同培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分,如谷氨酰胺或生长因子耗尽、或缺乏、或已被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;接种细胞起始浓度太低,细胞已老化;支原体污染
(2)对策:比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验,让细胞逐渐适应新培养;换入新鲜配制培养液,补加谷氨酰胺或生长因子;用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物,或用抗生素除菌;血清需保存在 -5 ℃ 到-20 ℃,培养液需在
2~8℃ 避光保存,含血清完全培养液在 2~8 ℃保存并在2 周内用完;增加接种细胞起始浓度,换用新的保种细胞;分离培养物,检测支原体,清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。
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